摘要： 本研究旨在建立一种高效液相色谱法（HPLC），同时测定饲料级酵母培养物中5种活性成分（腺苷、尿苷、肌苷、鸟苷、胞苷）含量。饲料级酵母培养物样品经磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L，pH 6.0）提取，β-葡聚糖酶辅助水解细胞壁，离心过滤后采用C18反相色谱柱分离，以磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相进行梯度洗脱，于254 nm波长下检测，外标法定量。结果表明：5种核苷在0.10～50.00μg/mL 浓度范围内线性关系良好（r2≥0.9990）|检出限（LOD）为0.15～0.30 mg/kg，定量限（LOQ）为0.51～1.00 mg/kg|在低、中、高3个加标水平下，平均回收率为85.2%～106.8%，批内相对标准偏差（RSD）为 2.1%～8.7%|专属性实验显示空白基质无干扰，目标峰分离度均＞1.5。样品前处理优化表明，50℃水浴酶解30 min时目标成分回收率显著高于10 min和20 min（P＜0.05）。对5种市售样品进行检测发现，腺苷含量最高（25.23～30.14 mg/kg），胞苷含量最低（4.83～8.64 mg/kg），所有样品检测RSD≤3.67%。该方法操作简便、灵敏度高、准确性好，适用于饲料级酵母培养物中多种核苷活性成分的日常检测与质量控制。
[关键词]HPLC|酵母培养物|核苷|同时测定|方法验证

关键词: HPLC, 酵母培养物, 核苷, 同时测定, 方法验证