中国饲料 ›› 2025, Vol. 1 ›› Issue (23): 93-100.DOI: 10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.2024110057-11
摘要: N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)是几丁质酶系主成分之一,为研究氨基酸对鱼类消化道几丁质酶的影响,本试验从日本鳗鲡(Anguilla japonica)肠道分离纯化获得NAGase酶制剂,采用酶促反应动力学以及酶抑制作用动力学方法研究18种氨基酸对日本鳗鲡肠道NAGase的影响。结果表明:非极性氨基酸丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、色氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸,以及不带电荷极性氨基酸谷氨酰胺、半胱氨酸、甘氨酸、苏氨酸和天冬酰胺对NAGase活力影响不明显或影响较小|但带负电荷的酸性氨基酸天冬氨酸和谷氨酸对NAGase均呈现低浓度下激活、高浓度下抑制的较大效应|带正电荷的碱性氨基酸赖氨酸、精氨酸和组氨酸对NAGase则有不同程度的抑制作用,赖氨酸和精氨酸对NAGase的抑制能力强,具有浓度效应,25 mmol/L的赖氨酸和精氨酸可分别使NAGase活力下降49.40%和58.46%。赖氨酸和精氨酸对NAGase的抑制均呈可逆的非竞争性抑制作用,抑制常数分别为28.289 mmol/L和16.837 mmol/L。此外,赖氨酸和精氨酸均可以使NAGase酶蛋白内源荧光发射强度减弱,25 mmol/L赖氨酸溶剂可使酶蛋白荧光几近猝灭。说明赖氨酸和精氨酸均可引起NAGase酶蛋白空间构象变化,从而导致对酶的抑制作用。试验结果证明酸性和碱性氨基酸对日本鳗鲡消化道NAGase具有较大的调控作用,本研究对氨基酸添加剂在养殖鱼类配合饲料中的科学使用具有指导意义。
[关键词] 氨基酸|日本鳗鲡|N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶|抑制作用|构象变化
中图分类号: