摘要： 为研究镉对牛肝实质细胞金属硫蛋白1A（MT1A）基因和凋亡基因的影响，本试验选用犊牛肝脏中分离培养的肝实质细胞，通过糖原染色和免疫荧光两种方式进行细胞鉴定，用含镉浓度为0、2.5、5、10、20 µmol/L的培养基处理肝实质细胞，分别提取处理12 h和24 h牛肝实质细胞的总RNA，逆转录后通过荧光定量PCR检测MT1A基因、半胱天冬蛋白酶-3（Caspase-3）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）基因的表达情况。结果表明：糖原染色鉴定显示细胞内的糖原被染成紫红色，免疫荧光鉴定显示细胞内大量表达绿色荧光的白蛋白，均表明分离培养的细胞为肝实质细胞。与对照组（0 µmol/L）相比，处理12 h，20 µmol/L组Caspase-3表达量极显著上调（P<0.01），而2.5、5、10 µmol/L组差异不显著|Bax在各浓度中表达量差异均不显著|2.5、5、10 、20 µmol/L组Bcl-2表达量极显著下调（P<0.01）|处理24 h，10、20 µmol/L组Caspase-3表达量极显著上调（P<0.01），而2.5、5 µmol/L组差异不显著|20 µmol/L组Bax表达量显著上调（P<0.05），而 2.5、5、10 µmol/L组表达差异不显著|2.5、5、10 、20 µmol/L组Bcl-2表达量极显著下调（P<0.01）。表明高浓度镉促进了MT1A的表达，同时也对肝实质细胞的凋亡具有一定的促进作用。本试验为后续探究牛肝脏细胞中MT1A对镉离子的解毒机理以及阐明MT1A对肝细胞凋亡的调控机制提供基础数据。

关键词: 镉, 牛, 肝实质细胞, MT1A基因, 凋亡基因  

中图分类号: 

• S543.7