摘要： 本试验旨在通过连续传代富集培养及平板筛选的方法获得瘤胃高效降解纤维素菌株，并基于体外发酵方法研究该菌不同生物量对奶牛瘤胃体外产气量、发酵参数及养分降解率的影响。通过口腔采集1头荷斯坦奶牛（泌乳天数211 d）瘤胃液并以厌氧富集培养基连续三代共培养21 d，以纤维素筛选培养基分离高效降解纤维素菌株，并基于16S rDNA基因序列和菌落形态进行菌株鉴定。选取3头体重为（550±50）kg、泌乳日龄（136±37）d且装有永久瘘管的荷斯坦奶牛作为瘤胃液的供体动物，瘤胃体外发酵试验共分为4组，每组4个平行，试验重复3次。高效降解纤维素菌株的添加浓度分别为0（对照组CK）、1×106 cfu/mL（试验组LV1-L）、1×107 cfu/mL（试验组LV1-M）和1×108 cfu/mL（试验组LV1-H），测定发酵3、6、9、12、24 h和48 h的产气量，发酵48 h后测定发酵液pH、氨态氮（NH3-N）和挥发性脂肪酸（VFA）浓度，发酵底物干物质（DM）、中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）降解率。结果显示：（1）筛选获得一株高效瘤胃纤维降解煎盘梭菌（Clostridium sartagoforme）LV1，其纤维素酶活性、内切葡聚糖酶活性及外切葡聚糖酶活性分别为（31.11±1.56）、（19.73±0.91）、（9.63±0.53）U/mL。（2）不同处理组的产气量在发酵初期有显著差异，与对照组相比，发酵3 h和6 h LV1-L组分别提高了25.0%和36.7%（P < 0.05）。（3）LV1-H组发酵液的pH比对照组显著降低了1.66%（P < 0.05），NH3-N含量显著升高了11.43%（P < 0.05）。（4）LV1-L组的戊酸浓度较对照组增加13.38%（P < 0.05）。（5）LV1-L组较对照组的NDF和ADF降解率分别提高了30.97%（P < 0.05）和21.29%（P < 0.05），较LV1-H组提高了18.02%（P < 0.05）和10.58%（P < 0.05）。本研究通过连续传代富集培养和平板筛选相结合，获得一株高效的瘤胃纤维降解煎盘梭菌，该菌以1×106 cfu/mL的浓度添加瘤胃体外发酵系统后可提高瘤胃发酵性能和纤维降解率。该研究可为瘤胃细菌资源挖掘和功能评估提供方法依据。
[关键词] 煎盘梭菌|体外发酵|纤维消化|产气量|挥发性脂肪酸

关键词: 煎盘梭菌, 体外发酵, 纤维消化, 产气量, 挥发性脂肪酸

中图分类号: 

• S816.3