摘要: 为探究饲料中添加富硒桑叶对鸡肉中硒蛋白种类和结构的影响,试验选用1日龄的海兰褐母鸡100只,随机分为2组,每组设置5个重复,每个重复10只。对照组(DD1组)饲料为普通谷物饲料,试验组(DD2组)饲料为普通谷物饲料中添加5%富硒桑叶,饲喂300 d后采集鸡肉进行试验。对鸡肉中蛋白进行分级提取,通过阴离子交换色谱法、凝胶过滤色谱法和SDS-PAGE法分别纯化DD1组和DD2组鸡肉中水溶性含硒蛋白质,通过HPLC-MS/MS对纯化硒蛋白序列进行鉴定,采用氢化物发生原子荧光光谱法对硒含量进行测定。结果表明:DD1组硒主要富集在盐溶性蛋白中,DD2组硒主要富集在水溶性蛋白中,DD2组纯化硒蛋白硒含量显著高于DD1组(P < 0.05)。纯化得到3种硒蛋白,分别为DD1组的SPr-1、DD2组的SPr-1和SPr-2,同时得到一种含硒蛋白,为DD1组的SPr-2。SPr-1和PPr-1是一种与无硒的卵转铁蛋白高度同源的硒蛋白,SPr-2是一种与无硒的卵清蛋白高度同源的硒蛋白,其中硒形态主要为硒代半胱氨酸和硒蛋氨酸。PPr-2是一种与无硒的M型肌酸激酶高度同源的含硒蛋白,硒主要以硒蛋氨酸的形式插入蛋白中。圆二色谱结果表明,DD1组和DD2组纯化硒蛋白均主要以α-螺旋为主。DD2组相较于DD1组纯化硒蛋白α-螺旋减少,无规则卷曲增加。综上,富硒桑叶可以改变鸡肉中硒蛋白组成、表达和结构。
[关键词] 富硒桑叶|富硒鸡肉|含硒蛋白|纯化鉴定
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