中国饲料 ›› 2024, Vol. 1 ›› Issue (23): 194-201.DOI: 10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.2024060001zk
摘要: 本实验旨在研发及优化一种基于时间分辨荧光 微球的呕吐毒素/黄曲霉毒素B1二合一荧光定量快速检测卡制备工艺,主要是从灵敏度、均一性两方面进行详细优化。结果表明:该方法快速、便捷,可一次提取检测,8 min内即可得到两个项目的检测结果。通过对不同粒径的时间分辨荧光微球标记抗体,确定了AD检测卡中DON胶乳所用的荧光微球粒径为210 nm,AFB1胶乳 所用的荧光微球粒径为240 nm |通过对AFB1标记过程中EDC加入量、抗体量的详细摸索,确定AFB1项目EDC量30 μL/mL、标记抗体量20 μg/mL,解决了AFB1灵敏度低的问题|通过对喷膜稀释倍数的优化,确定了胶乳的稀释倍数,解决了DON均一性差的问题|通过对划膜位置的筛选,确定了DON、AFB1、C线的划膜位置距NC膜上端依次为 T1线(16 mm)、T2线(11 mm)、C线(6 mm)。呕吐毒素/黄曲霉毒素B1二合一荧光定量快速检测卡检测值与液相色谱法检测出的结果相符,检测玉米、小麦样本中AFB1含量的准确度为92.68%~115.07%,检测玉米、小麦样本中DON含量的准确度为92.85%~118.63%,准确度的平均值高达102.41%。
[关键词] 黄曲霉毒素B1|呕吐毒素|时间分辨荧光定量|快速定量检测
中图分类号: